乙酰化通過將乙?;砑拥降鞍踪|的某一氨基酸殘基上,影響其結構和功能。因此,乙?;臋z測對于理解蛋白質功能的改變與調控具有重要的意義。乙酰化怎么檢測呢?通常,有兩種主要的檢測方法:免疫印跡法(Western blot)和免疫沉淀法(Immunoprecipitation)。免疫印跡法可以用于檢測蛋白質的乙?;?,而免疫沉淀法則可以用于鑒定乙酰化的特定位點。
在免疫印跡法中,首先需要提取蛋白質樣本,然后通過SDS-PAGE電泳將蛋白質分離,再將電泳后的蛋白質轉移至聚偏氟乙烯膜上,使用特異性抗體(例如乙酰化抗體)進行檢測,最后通過化學發光法或者其他方式進行結果的顯示。而在免疫沉淀法中,乙酰化怎么檢測主要是通過使用特異性抗體將目標蛋白質及其乙?;稽c從復雜的生物樣本中沉淀出來,進一步通過質譜分析進行鑒定。
常見問題:
Q1. 乙酰化的檢測結果如何解釋?
A:乙?;臋z測結果通常表現為一條或多條條帶,這表明該蛋白質在不同程度上被乙酰化。條帶的強度代表了乙?;潭鹊拇笮 ?/p>
Q2. 除了免疫印跡法和免疫沉淀法,還有其他乙?;趺礄z測的方法嗎?
A:還有一種稱為質譜法的檢測乙酰化的方法。通過質譜法可以更準確地確定蛋白質的乙酰化位點,這對于理解乙?;瘜Φ鞍踪|功能的影響十分關鍵。
Q3. 乙?;臋z測有什么應用方向?
A:乙?;臋z測在生物學研究中有廣泛的應用,如蛋白質功能研究、疾病機理研究等。此外,乙?;降母淖円渤1挥米骷膊。ㄈ绨┌Y)的生物標志物。
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對蛋白質序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對蛋白質的氨基酸組成分析,N端測序,C端測序和全序列分析,以及基于埃德曼降解的蛋白質N端序列分析服務。對于未知理論序列的蛋白質,提供基于從頭測序法的蛋白質從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優勢:
1.采用目前世界上先進的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量蛋白質組學、靶向蛋白質組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白質組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析,發現新的生物標記物;
2.體內體外多種蛋白質標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.專業生物信息學分析,分析更系統準確。
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,最后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
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1.技術先進,填補技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題??稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
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單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
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①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
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③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從最小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從蛋白質、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務,幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。
百泰派克生物科技(BTP)采用優化的CRISPR/Cas9系統為您提供高通量基因敲除服務,包括病毒包裝、質粒制備、Cas9濃度測試等,為您解決選擇哪個細胞進行敲除、可不可以敲除、如何敲除以及敲除效率如何等關鍵問題??蛇M行單/多基因敲除、移碼突變和大序列敲除。我們的人全基因組基因敲除陣列Array文庫覆蓋了完整的人類全基因組,全基因組陣列敲除庫已在人原代細胞全部完成高內涵篩選的驗證,超過80%以上的靶點達到70%以上的敲除效率。
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在進行基因敲除實驗前,我們會基于生物信息學和蛋白質組學數據對不同細胞中基因必要性及表達量進行分析,確保實驗的可行性,降低實驗風險。
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我們完成了人類全基因組gRNA的全部驗證,與藥物相關的靶點也完成了PCR測序驗證,無需針對客戶的靶點設計預實驗進行gRNA驗證,大大縮短了項目周期。
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我們采用優化的CRISPR/Cas9系統進行高通量基因敲除,多個sgRNA/靶基因設計保證高敲除效率,超過80%靶點敲除效率在70%以上,短期內(10天內)即可提供高敲除效率的KO pool,滿足絕大多數的應用場景。
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基因敲除后,我們采用WB實驗中抗體KO驗證的首選方法——Sanger測序和深度蛋白質組學技術對敲除效率進行雙驗證,數據真實性的雙重保障。
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等專業服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數據冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。
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注:該產品未在中華人民共和國食品藥品監督管理部門申請醫療器械注冊和備案,不可用于臨床診斷或治療等相關用途。